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              小鼠音猬因子N端(Shh-N)ELISA試劑盒操作步驟

              發布時間:2021-09-15   點擊次數:108次

              小鼠音猬因子N端(Shh-N)ELISA試劑盒操作步驟:


              1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

              2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

              3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

              4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

              5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

              6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

              7. 溫育:操作同3。

              8. 洗滌:操作同5。

              9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

              10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

              11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

              類固醇受體復合物蛋白FKBP5抗體

              纖維性鞘結合蛋白1抗體

              纖維細胞生長因子結合蛋白2抗體

              肌動蛋白結合蛋白Fascin3抗體

              結構特異性核酸酶FEN1抗體

              FAM61B蛋白抗體

              FAM63A蛋白抗體

              上皮分泌型FAM3C蛋白抗體

              FAM36A蛋白抗體

              FAM50A蛋白抗體

              FAM134C蛋白抗體

              凝溶膠蛋白家族Fli-1抗體

              乙型肝炎病毒X蛋白反轉錄蛋白9抗體

              卵泡抑素相關蛋白5抗體

              叉頭相關轉錄因子C2抗體

              Fbx15蛋白抗體

              FRMD2蛋白抗體

              FAM98B蛋白抗體

              FAM50C蛋白抗體

              FAM91A1蛋白抗體

              FRMD1蛋白抗體

              髓鞘缺陷相關蛋白抗體

              叉頭蛋白B1+B2抗體

              叉頭蛋白G1抗體

              腫瘤/睪丸抗原抗體112抗體

              微管動力調節蛋白FAM82A抗體

              FAM50B蛋白抗體

              形成素2抗體


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