1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘。
類固醇受體復合物蛋白FKBP5抗體
纖維性鞘結合蛋白1抗體
纖維細胞生長因子結合蛋白2抗體
肌動蛋白結合蛋白Fascin3抗體
結構特異性核酸酶FEN1抗體
FAM61B蛋白抗體
FAM63A蛋白抗體
上皮分泌型FAM3C蛋白抗體
FAM36A蛋白抗體
FAM50A蛋白抗體
FAM134C蛋白抗體
凝溶膠蛋白家族Fli-1抗體
乙型肝炎病毒X蛋白反轉錄蛋白9抗體
卵泡抑素相關蛋白5抗體
叉頭相關轉錄因子C2抗體
Fbx15蛋白抗體
FRMD2蛋白抗體
FAM98B蛋白抗體
FAM50C蛋白抗體
FAM91A1蛋白抗體
FRMD1蛋白抗體
髓鞘缺陷相關蛋白抗體
叉頭蛋白B1+B2抗體
叉頭蛋白G1抗體
腫瘤/睪丸抗原抗體112抗體
微管動力調節蛋白FAM82A抗體
FAM50B蛋白抗體
形成素2抗體
