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              自然抗性相關巨噬細胞蛋白2試劑盒?操作步驟

              發布時間:2021-10-12   點擊次數:67次

              自然抗性相關巨噬細胞蛋白2試劑盒操作步驟:


              1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

              2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

              3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

              4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

              5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

              6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

              7. 溫育:操作同3。

              8. 洗滌:操作同5。

              9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

              10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

              11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

              谷胱甘肽S轉移酶α4(GSTα4)重組蛋白

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              谷胱甘肽S轉移酶κ1(GSTκ1)重組蛋白

              谷胱甘肽S轉移酶μ2(GSTμ2)重組蛋白

              谷胱甘肽S轉移酶π1(GSTπ1)重組蛋白

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              骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)重組蛋白

              骨成型蛋白受體1B(BMPR1B)重組蛋白

              骨鈣素(OC)重組蛋白

              骨橋素(OPN)重組蛋白

              骨涎蛋白(BSP)重組蛋白

              骨形成蛋白6(BMP6)重組蛋白

              胱天蛋白酶14(CASP14)重組蛋白

              胱天蛋白酶3(CASP3)重組蛋白

              胱天蛋白酶5(CASP5)重組蛋白

              胱天蛋白酶7(CASP7)重組蛋白

              胱天蛋白酶8(CASP8)重組蛋白

              胱天蛋白酶9(CASP9)重組蛋白

              胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶(CAD)重組蛋白

              歸巢關聯細胞黏附分子(HCAM)重組蛋白

              果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)重組蛋白

              過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白

              過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)重組蛋白


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