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              ArcticExpresspRARE2 感受態細胞?培養操作規程

              發布時間:2022-06-15   點擊次數:87次

              ArcticExpress(DE3)pRARE2 感受態細胞培養操作規程:

              一.培養基及培養凍存條件準備:

              1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

              2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

              3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

              二.細胞處理:

              1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

              2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

              對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

              方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

              小鼠基質金屬蛋白酶抑制劑-2(mouse TIMP-2)

              小鼠腫瘤壞死因子-a(mouse TNF-a)

              小鼠腫瘤壞死因子-b(mouse TNF-b)

              小鼠腫瘤壞死因子-r(mouse TNF-r)

              小鼠組織纖溶酶原激活劑(mouse t-PA)

              小鼠轉鐵蛋白(mouse Transferrin)

              小鼠胸腺基質淋巴細胞生成素(mouse TSLP)

              小鼠血栓烷B2(mouse TXB2)

              小鼠可溶性腫瘤壞死因子-a受體(mouse sTNF-aR)

              小鼠組織多肽抗原(mouse TPA)

              小鼠血小板生成素(mouse TPO)

              小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(mouse TRAIL/APO 2L)

              小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體1(mouse TRAIL R1)

              小鼠凝血酶敏感蛋白-1(mouse TSP-1)

              小鼠血栓調節蛋白(mouse TM)

              小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(mouse uPA)

              小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(mouse uPA-R)

              小鼠血管細胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)

              小鼠血管內皮生長因子(mouse VEGF)

              小鼠血管內皮細胞生長因子B(mouse VEGF-B)

              小鼠血管內皮細胞生長因子C(mouse VEGF-C)

              小鼠血管內皮細胞生長因子D(mouse VEGF-D)

              小鼠血管內皮細胞生長因子受體1(mouse VEGF-R1)


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