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              大鼠內臟脂肪細胞保存

              大鼠內臟脂肪細胞保存

              產品時間:2020-07-22

              訪問量:113

              廠商性質:經銷商

              生產地址:進口、國產

              簡要描述:
              大鼠內臟脂肪細胞保存在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
              品牌其他品牌CAS詳見說明書
              分子式詳見說明書純度詳見說明書
              分子量詳見說明書貨號GOY-Y3461
              規格5×105/瓶供貨周期現貨
              主要用途公司產品僅用于科研應用領域化工

              以下是訂購信息:

              產品名稱英文名稱貨號
               大鼠內臟脂肪細胞保存Rat Fat: Normal Visceral Fat Cells GOY-Y3461

              大鼠內臟脂肪細胞【Rat Fat: Normal Visceral Fat Cells
                   產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的大鼠原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在公司生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。
               冷凍保存細胞之方法?
              冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
              冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

               

              實驗報告:

              一、分離與培養:產品僅供科研
                  1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將組織剪成1mm3左右大??;
                  2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
                  3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
                  4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
                  5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
              二、免疫熒光鑒定:
                  1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
                  2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
                  3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
                  4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
                  5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
                  6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

              下列是公司正在促銷產品:

              小鼠血漿α顆粒膜蛋白elisa試劑盒   小鼠血漿α顆粒膜蛋白試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠血漿α顆粒膜蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠血漿α顆粒膜蛋白試劑盒、小鼠血漿α顆粒膜蛋白eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Betamipron  3440-28-6  中文名:倍他米隆  分子式:C10H11NO3 

              小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Boc-3-Phenylisoserine  中文名:  分子式:C14H19NO5 

              小鼠血紅素氧合酶elisa試劑盒   小鼠血紅素氧合酶試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠血紅素氧合酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠血紅素氧合酶試劑盒、小鼠血紅素氧合酶elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Mizolastine  中文名:咪唑司汀  分子式:C24H25FN6O 

              小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methylprednisolone hemisuccinate  中文名:  分子式:C26H34O8  度:98.0%

              小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Coumarin 7  中文名:香豆素分子式:C20H19N3O2  度:98.0%

              小鼠表皮生長因子受體(mouse EGF R)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  Chlorogenic acid  327-97-9  中文名:綠原酸  分子式:C16H18O9 

              小鼠表皮生長因子elisa試劑盒   小鼠表皮生長因子試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠表皮生長因子試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠表皮生長因子試劑盒、小鼠表皮生長因子eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Cholesterol  中文名:膽固醇  分子式:C27H46O  度:98.0%

              小鼠表皮生長因子(mouse EGF)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  Chlorogenic acid  327-97-9  中文名:綠原酸  分子式:C16H18O9  度:98.0%  關鍵詞:  抗病毒; 抗氧化; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

              小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Chlorotetracycline  57-62-5  中文名:金霉素  分子式:C22H23ClN2O8 

              小鼠表皮生長因子   英文名稱:   epidermal growth factor-like growth factor   規格:   48T/96T   英文縮寫:   EGF  Meclizine   1104-22-9  中文名:鹽酸美克洛嗪  分子式:C25H29Cl3N2

              兔阿霉素(ADR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate  中文名:  分子式:C22H25N3O2 

              兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-Aminoindole  中文名:5-氨基吲哚  分子式:C8H8N2 

              S100b   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝     4-Aminosalicylic acid  中文名:4-氨基水楊酸  分子式:C7H7NO3 

              S100A6蛋白   英文名稱:   Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6   規格:   48T/96T   英文縮寫:   S100A6  4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  4551-69-3  中文名:4-苯甲?;?/span>-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式:C17H14N2O2  度:98.0%   

              P-選擇素(rabbit P-selectin)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  116856-18-9  中文名:  分子式:C7H9N3O3

              Tenacigenoside A  中文名:  分子式:C35H56O12  度:兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

              Daturataturin A aglycone  中文名:  分子式:C28H38O5  度:93.0%  兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

              6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  中文名:  分子式:C29H46O2  度:兔內皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

              Oleandrin  中文名:  分子式:C32H48O9  度:98.0%  兔內皮素(Endothelin-1ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

              β-Anhydrouzarigenin  中文名:  分子式:C23H32O3  度:97.0%  兔內皮抑素(rabbit ES)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝

              培養操作:

              大鼠內臟脂肪細胞保存1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
              2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。      
              1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
              2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
              3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
              4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
              3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
              1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
              2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
              3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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