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              轉基因元件adh1啟動子LAMP試劑盒

              轉基因元件adh1啟動子LAMP試劑盒

              產品時間:2020-08-05

              訪問量:227

              廠商性質:經銷商

              生產地址:進口、國產

              簡要描述:
              轉基因元件adh1啟動子LAMP試劑盒低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。陽性對照需要因易污染其他成分需要單獨放置。本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供DN段作為陽性對照。
              品牌其他品牌CAS詳見說明書
              分子式詳見說明書純度詳見說明書
              分子量詳見說明書貨號GOYP63866
              規格50次供貨周期現貨
              主要用途公司產品僅用于科研應用領域化工
              產品名稱 轉基因元件adh1啟動子LAMP試劑盒
              英文名稱 Lamp kit for promoter of transgenic element Adh1
              規格 50次

               

              產品優勢:
              1.隨時可用。
              2.優化的緩沖液可增強特異性并減少引物二聚體的形成。
              3.高靈敏度,特異性和可靠性。
              4.為不同的qPCR儀器提供了被動參考染料。

              使用方法:
              產品僅用于科研一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
              1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DN段作為陽性對照。
              2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
              3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
              4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
              5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
              6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
              7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

              實驗過程:
              一、試劑準備
              1. DNA模板
              2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
              3.10×PCR Buffer
              4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
              5.Taq酶
              二、操作步驟
              1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
              10×PCR buffer             5μl
              dNTP mixl                 4μl
              引物1(10pM)               2μl
              引物2(10PM)              2μl
              Taq酶(2U/μl)            1μl
              DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
              加ddH2O至               50 μl
              視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
              2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
              3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
              4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
              三、注意事項
              1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個的PCR實驗室。
              2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
              3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
              4.PCR試劑配制應使用高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
              5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
              6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
              7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。

              PCR實驗步驟:
              ①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
              ②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
              ③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
              ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
              ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
              ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

              儲存條件:
              僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
              1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
              2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
              3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
              4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
              5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 LCN2 Others Mouse 小鼠 LCN2 / NGAL 人細胞裂解液 (陽性對照) 膽壬酸酯(>89.0%(GC))質量規格:>89.0%(GC)Cholesterol Pelargonate
              3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞膽壬基碳酸酯質量規格:Cholesterol Nonyl Carbonate
              B2M Others Rat 大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 人細胞裂解液 (陽性對照) 膽庚基碳酸酯質量規格:Cholesterol Heptyl Carbonate
              大鼠海馬神經元細胞完全培養基 100mL膽油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))質量規格:>70.0%(HPLC)Cholesterol Oleyl Carbonate
              MDCK(NBL-2)狗腎細胞 MDCK (NBL-2) dog kidney cells MEM(GIBCO)+10%FBS熊果苷質量規格:≥98%,BRArbutin
              HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) eetonitnILEWITH0.1%GLACIALACETIC以,含0.1%HPLC級透明無色液體RT不sigma
              CL-0289MDA-MB-435(人癌高轉移細胞)5×106cells/瓶×21,3,5-三肖基本;隊稱三肖基本 1,3,5-Trinitnobqnzqnq;syM-Trinitnobqnzqnq;Bqnzit;TNB 99-32-4
              TT細胞,髓性甲狀腺癌細胞 人成巨核細胞白血病細胞,MEG-01細胞 人急性母細胞性白血病細胞;MOLT-4言醋哌卡應 Mqpivcccinq xy7nochloridq 2017/6/9
              4T1(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2矢車菊苷,英文名或英文縮寫:Kuromanin chloride,級別:BR,99%,規格:20/240ug/支
              MME Others Human 人 CD10 / MME / Neprilysin 人細胞裂解液 (陽性對照) 28697-53-2D-阿拉伯糖D(-)-Arabinose
              UMR-106(大鼠骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC-12, 人臍靜脈血管內皮細胞系L-本甘酸鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:100克
              CM-R105大鼠神經元細胞完全培養基100mL反玉米素核苷 trans-Zeatin-riboside,95% 6025-53-2 10MG 通用試劑
              CD226 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD22 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙酚AF Hqxcfluorobisphqnol c 1478-61-1
              小鼠腎小管上皮細胞MREpiCPVF聚醇縮5克AR,99%
              DU-145細胞,人前列腺癌細胞 小鼠腦瘤細胞,BC3H1細胞 人肺動脈成纖維細胞HPAF35037-73-1對三扶甲氧基本4-(Trifluorometxoxy)pxenyl isocyanate
              CL-0327Calu-6(人肺退行性癌細胞)5×106cells/瓶×2鳥嘌呤硫酸鹽Guanine Sulfate質量規格:>98.0%,進口原裝
              P3-X63-Ag8細胞,骨髓瘤細胞 人T細胞白血病細胞,A3細胞 EB病毒轉化的人B細胞;KMY0909腺嘌呤轉基因元件adh1啟動子LAMP試劑盒鹽酸鹽Adenine hydrochloride質量規格:>98%,BR
              5637(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2肌苷;核苷Inosine質量規格:>98.5%,BR
              FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細胞裂解液 (陽性對照) 肌苷(標準品)Inosine質量規格:HPLC>98%,標準品
              人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]5‘-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽(AMP2Na)5'-AMP-Na2質量規格:>98%,BR

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